实验步骤

1. 如果采用刺激物，则可在实验前三天腹腔注射3%巯基乙醇酸钠每只2 mL，获得的巨噬细胞数要多一些。不采用刺激物，直接开始下面的步骤。

2. 拉颈处死小鼠，在75%酒精浸泡1-2 分钟，移入超净台中，仰卧位固定于解剖板上，碘酒消毒腹部皮肤，酒精绵球脱碘。用手术直剪充分剪开腹部皮肤，暴露腹部肌层，再用酒精绵球消毒腹部肌层。

3. 用注射器抽取5mL 含双抗的RPMI 1640 培养基注入腹腔，用绵球轻揉腹部1-2 min，然后，用眼科镊稍提起腹腔，并用眼科剪剪开一个小口，用吸管吸取细胞悬液，移入离心管中(个人认为，此法比用注射器抽吸好一些)。

4. 1000 rpm 离心5 min 后，用含双抗的RPMI 1640 培养基洗涤一次，再次离心，重悬细胞于含10% 小牛血清的RPMI 1640 培养液中，如果是作为饲养细胞使用，则选择相应的培养液。台盼蓝拒染法计数，将细胞稀释到目的浓度后，接种即可。

5. 如果是作为饲养细胞使用，调整浓度至2x105个/mL，接种到96 孔板中，每孔100-200μL；如 果作为其它实验使用，可以调整成2x106/mL，加到 24 孔平底培养板中，1 mL/孔；5% CO2温箱孵育2 h 后， 换液，并用RPMI 1640 培养基洗1-2 次，弃去未粘附细胞，贴壁细胞为单层的巨噬细胞。

结果 ：

巨噬细胞刚贴壁时偏圆形，或者类似鹅卵石形状，然后慢慢伸出伪足，铺开呈三角形或多角形。巨噬细胞有吞噬的特性，当与细菌混合在一起的时候，在40 倍物镜下可以看到巨噬细胞吞噬细菌，因此，巨噬细胞作为饲养细胞可以清除部分污染的细菌、支原体和部分细胞碎片。

于国内焊接工艺（会存在缝隙）会更准确一些。有稀释计算器功能。PLUS是EVE的升级款，在检测时间和性能上做了升级，依然保持了非常高的准确度/稳定性。增加了自动聚焦的功能，检测速度进行了提升，手动聚焦模式下1秒即可完成计数，自动聚焦会在10秒内显示结果。PLUS的机型设计也进行了改善-更美观，在运行灵敏度上也比EVE有所提升。HT和HT FL是EVE系列中的高通量自动细胞计数仪，适合工业生产或样本测量数量要求高的客户。HT可实现在3分钟内一次性计数48个样本，大大提高了计数效率，节约时间和人工成本。在同一块计数板里还可以不同细胞系的计数，提供多测试结果，更加高效

转载：

http://www.biomart.cn/experiment/484.htm